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U-2 OS細胞,人骨肉瘤細胞形態(tài)
產(chǎn)品名稱(chēng):U-2 OS細胞
中文名稱(chēng):人骨肉瘤細胞
來(lái)源:人骨肉瘤
類(lèi)別:類(lèi)屬于正常細胞
細胞形態(tài):上皮樣
生長(cháng)狀態(tài):貼壁生長(cháng)
培養基:McCoy's 5a 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培養條件:37℃,5% CO2
消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液,消化 5-10min
主營(yíng)細胞:HT-22細胞,HUVEC細胞,A549-luc-puro細胞,U87-MG細胞,SNU-739細胞
消化比例:1:3-1:6
換液時(shí)間:2-3 天換液一次
凍存液比例:85%培養基,10%FBS,5% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
主營(yíng)細胞:BEL-7404細胞,HCT-116細胞,SK-OV-3細胞,IOSE80細胞,HL-7702細胞
若客戶(hù)收到2ml小管U-2 OS細胞,人骨肉瘤細胞形態(tài)
收到細胞以后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超菌臺內,嚴格無(wú)菌操作;然后將小管細胞轉移至T25培養瓶,加入5ml左右含FBS的培養基混勻,放入培養箱隔夜培養后查看細胞匯合度:若未超過(guò)80%匯合度,換液繼續培養,根據情況傳代或者凍存。若超過(guò)80%匯合度,可直接進(jìn)行傳代(細胞貼壁處理方法)。
1、細胞在培養瓶中培養至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實(shí)驗室后,先打開(kāi)外包裝,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無(wú)菌操作。
2、鏡下觀(guān)察:將瓶裝的*培養液移入無(wú)菌瓶中,留待日后培養用,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養液,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過(guò)80%匯合度時(shí),按要求比例消化傳代。(收到細胞,建議棄去原基培養,使用新鮮*培養基培養)
3、消化方法:
1、將瓶裝的*培養液移入無(wú)菌瓶中,留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。(收到細胞,建議棄去原基培養,使用新鮮*培養基培養)
2、T25瓶加3ml PBS,洗一次,棄上清,再加1ml消化液消化,顯微鏡下觀(guān)察,等細胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)后,加培養基混勻,離心收集,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6, 1:6-1:8),每T25瓶加培養基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養。
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