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MG63細胞,人骨肉瘤細胞 傳代說(shuō)明

發(fā)布時(shí)間:2019-06-20瀏覽:3543次

細胞名稱(chēng):MG63 人骨肉瘤細胞

貨號:H080

種屬:人

細胞來(lái)源:從ATCC/中科院/協(xié)和醫院等地引進(jìn)

生長(cháng)特性:貼壁 上皮樣

培養條件:培養基:90%DMEM+10%FBS(推薦使用HAKATA優(yōu)等胎牛血清HN-FBS-50)

溫度:37℃    

氣相:95%空氣,5%二氧化碳

傳代說(shuō)明:

1.用75%酒精噴灑整個(gè)培養瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進(jìn)行1-3小時(shí)的緩沖,.然后置于無(wú)菌操作臺,打開(kāi)瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基(以T25培養瓶為例)并置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長(cháng)狀況及培養基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代,一般2到3天換一次液;

2.待細胞長(cháng)滿(mǎn)瓶底面積80%-90%,需要對其進(jìn)行傳代,傳代比例為1:3到1:8;

3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀(guān)察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見(jiàn)細胞脫落為*消化時(shí)間,記錄*消化時(shí)間,以便于下次消化),消化好后加入3ml*培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養基重懸細胞,進(jìn)行傳代。

保存說(shuō)明:

凍存條件:80%*培養基+10%FBS+10%DMSO

(備注:建議使用本公司的冷凍液(H-W-100),用4度保存的冷凍液直接重懸細胞,不能預熱后使用。)

保存條件:液氮存儲

常見(jiàn)問(wèn)題說(shuō)明:

1.培養瓶有破裂,培養液有漏液:細胞極大可能會(huì )污染,所以我們會(huì )及時(shí)安排幫老師解決。

2.收到細胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養基,如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加 10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時(shí)間zui長(cháng)不宜超過(guò) 72 小時(shí))

3.細胞漂?。号囵B瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。1-2小時(shí)后觀(guān)察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉,留8-10ml培養液培養觀(guān)察,細胞生長(cháng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養瓶,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀(guān)察,我們的技術(shù)人員會(huì )一直跟蹤指導,直到問(wèn)題解決。

 

供應商:慧穎細胞庫 人源均來(lái)自于第三方str鑒定,請放心購買(mǎi)

供應限制:僅供科研使用

 

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